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重组酿酒酵母5-氨基酮戊酸合酶在大肠杆菌的表达
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摘要:
以酿酒酵母基因组为模板,采用PCR扩增出编码成熟5-氨基酮戊酸合酶(第一个氨基酸残基为Asn63)的基因hem1,将其克隆到pMAL-2x中构建重组表达载体,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),在0.5 mmol·L-1的IPTG诱导下,SDS-PAGE显示分子量约为49 kD的特异条带.重组菌在紫外灯下显示红色荧光,表明酶在大肠杆菌体内活性表达.体外反应表明,在浓度超过0.1 mmol·L-1的IPTG诱导下,酶活力下降,培养基的初始pH值约为6.5,5-氨基酮戊酸产量达最大,且主要分泌到胞外.
关键词:  5-氨基酮戊酸合酶  酿酒酵母  重组表达  5-氨基酮戊酸产量  重组酿酒酵母  氨基酮戊酸  合酶  转化大肠杆菌  活性表达  Escherichia coli  胞外  产量  培养基  酶活力  浓度  反应  菌体  红色荧光  紫外灯  重组菌  特异条带  分子量  显示  IPTG
DOI:
投稿时间:2006-05-22
基金项目:安徽省科技攻关项目
Over-expression of 5-aminolevulinate synthase from Saccharomyces cerevisiae in Escherichia coli
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Abstract:
Key words:  5-aminolevulinate synthase,Saccharomyces cerevisiae,overxpression,5-aminolevulinate production

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